天然来源的胸苷磷酸化酶的分离纯化

【作者】 应国清； 熊文说； 易喻； 刘化章； 王鸿；

【机构】 浙江工业大学药学院；

【摘要】 <正>为了得到酶法生物转化2-脱氧-α-D-核糖1-磷酸和胸腺嘧啶成为胸苷的酶,从而建立一种新的核苷及其衍生物的生产工艺。我们以大肠杆菌为酶源,经过超声破胞、硫酸铵盐析、透析除盐,然后经过切向流膜分离系统分离得到30KD-100KD 分子量的胸苷磷酸化酶粗酶液。以胸苷为底物,酶活力定义为每分钟产生1μmol/L 胸腺嘧啶的所消耗的酶量为一个酶活单位。经检测,30KD 以下和100KD 以上分子量的粗酶液无法将胸苷转化为胸腺嘧啶,不显示酶活, 而30KD-100KD 分子量的粗酶液的酶活放置2个月仍有640单位酶活。更多还原