肺泡灌洗液荧光定量PCR测定诊断肺结核的临床价值

【作者】 张红漫； 李志惠； 刘朋冲； 耿书军； 李毅； 宋韬； 赵杰；

【机构】 河北省胸科医院；

【摘要】 目的肺结核是呼吸科常见疾病,发病率近年有增高趋势。痰结核杆菌阴性肺结核在临床上颇多见。为提高痰结核杆菌阴性肺结核诊断率,我们应用荧光定量聚合酶链反应(PCR)法对肺泡灌洗液中结核杆菌DNA进行了测定。方法随机选择197名具有典型症状及X线表现,通过治疗动态观察确诊的肺结核患者.痰涂片抗酸染色阴性(三次阴性)或无痰者;行纤维支气管镜检查于镜下见异常者或于胸片/CT异常的相应叶段内行支气管肺泡灌洗,收集支气管肺泡灌洗液(BALF) 5ml,行荧光定量PCR检测及经支气管镜防污染毛刷刷检涂片抗酸染色。同时选择同期住院的112名痰涂片抗酸染色阳性(2次+或1次++以上者)患者,以同样方法行支气管肺泡灌洗,收集回收液行荧光定量PCR检测及经支气管镜防污染毛刷刷检涂片抗酸杆菌检查。全部病例均未合并其他细菌或真菌感染。结果菌阴肺结核患者支气管肺泡灌洗液荧光定量PCR检测阳性者为119/197例,阳性率为60.40%,经支气管镜防污染毛刷刷检抗酸染色阳性者为78/197例,阳性率为39.25%。菌阳肺结核患者支气管肺泡灌洗液荧光定量PCR检测阳性者为109例,阳性率为97.32%,经支气管镜防污染毛刷刷检抗酸染色阳性者为65例,阳性率为58.03%。讨论荧光定量PCR(FQPCR)技术集PCR和DNA探针杂交技术的优点为一体,直接探测PCR过程中的荧光变化,获得DNA模板的准确定量结果,整个过程在闭管状态下进行,避免了因污染而导致的假阳性。本组荧光定量PCR方法检测BALF中TbDNA诊断肺结核,检出结核杆菌阳性率显著高于痰涂片抗酸染色和支气管镜防污染毛刷刷检抗酸染色阳性率,达到了提高诊断符合率快速诊断疾病目的,尤其对临床不典型肺结核的诊断与治疗具有参考价值,同时可为临床评价疗效及判断预后。荧光定量PCR方法检测BALF中TbDNA快速、特异、敏感的特点,是一种值得临床推广的方法。更多还原