家蚕中肠来源肠球菌抑制家蚕微粒子虫孢子发芽的研究

【作者】 汪方炜； 鲁兴萌；

【机构】 浙江大学动物科学学院特种经济动物科学系；

【摘要】 本研究以家蚕中肠来源的肠球菌和家蚕病原性微粒子虫为材料,首次报道肠球菌抑制微孢子虫孢子发芽的研究结果。从细菌性肠道病病蚕消化道分离到一株肠球菌菌株Enterococcus faecalis ZJU,接种pH7.0的MRS肉场培养基,在37℃下以120r/min振荡培养36h后,其上清液对家蚕微粒子虫(Nosema bombycis)孢子的发芽显示了一定的抑制活性。利用30%～60%饱和度的硫酸铵盐析、Sephadex G—75凝胶过滤层析和阴离子交换层析等蛋白质纯化技术,从该菌株的培养上清液中提纯到一种能显著抑制N.b孢子发芽的蛋白质,暂命名为Anti—MicrosporidianProtein,简称AMP。经上述方法纯化后的AMP对N.b 孢子发芽的抑制比活力为476.97 IU/mg,纯化倍数为17.84,活力回收率为27.36%。PAG图谱呈现单一条带。AMP对热稳定,对酶不敏感。肠球菌培养上清液和MRS肉汤培养基的硫酸铵盐析粗提物的PAGE图谱表明,AMP是该菌株在代谢过程中合成并外分泌至培养基中的。更多还原