短发夹RNA靶向抑制SOCS1基因对CML28树突状疫苗的增敏作用研究

【作者】 周红升； 张东华； 刘文励； 汪涯雅； 谭获； 黄振倩；

【机构】 华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究院造血干细胞移植研究室同济医院血液科； 广州医学院附属第一医院肿瘤血液中心；

【摘要】 <正>目的 CML28是一个新近发现的肿瘤相关抗原,在血液肿瘤以及多种实体瘤中广泛表达,是移植后移植物抗白血病效应(GVL)的重要靶抗原之一,我们的前期研究构建了CML28树突状细胞核酸疫苗,成功诱导出CML28特异性的细胞毒T细胞(CTL),为增强该疫苗的活性,本研究拟通过采用RNAi技术,沉默负性调控DC成熟以及抗原提呈的关键基因SOCS1,达到对CML28 DC核酸疫苗的增敏作用的目的。方法在本研究中,我们先选择设计了针对SOCS1基因的siRNA转录模板,设计成两条以9个碱基分隔的反向重复序列,两端形成Bbs Ⅰ的粘性末端,并以5个T作为 RNA聚合酶Ⅲ的转录中止子,将上下游两条寡核苷酸退火后定向克隆至短发夹RNA(shRNA)表达更多还原