应用siRNA靶向诱导K562细胞凋亡的研究

【作者】 陈波斌； 林果为； 袁正宏； 范华骅； 陆华中；

【机构】 复旦大学附属华山医院血液科； 复旦大学医学院分子病毒学教育部重点实验室； 上海市血液中心；

【摘要】 <正> 目的探索利用RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术靶向干预诱导慢性粒细胞性白血病K562株发生凋亡的效应。方法以靶基因的关键区域作为靶点,构建表达siRNA的RNA表达载体,转染靶细胞,观察诱导细胞凋亡的效应。按照siRNA的设计原则,选择BCR-ABL mRNA融合区域的19个核苷酸为作用靶点,设计并合成针对靶区域序列的正义链和反义链:T21 5’-CGT CTC AAG TTT TCGGGA A TTC AAG AGA CCC GAA AAC TTG AGA CGA A TTT TTT-3’,T32 5’-AAT TAA AAA ATTCGT CTC AAG TTT TCG GGT CTC TTG AAT TCC CGA AAA CTT GAG ACG GGC C-3’,退火产生双更多还原