八肽胆囊收缩素抑制LPS诱导的主动脉平滑肌细胞iNOS和HO-1基因的表达

【作者】 段国辰； 凌亦凌； 谷振勇； 韦鹏； 牛志云； 杨世方；

【机构】 河北医科大学病理生理教研室；

【摘要】 目的:为探讨八肽胆囊收缩素（CCK-8）逆转内毒素休克（ES）时平均动脉压降低的机制,观察了LPS对大鼠主动脉平滑肌细胞（ASMC）的iNOS InRNA、HO-1mRNA的表达变化及CCK对该变化的影响。方法:实验分为:（1）对照组:（2）LPS组,LPS（10μg/ml）作用ASMC细胞4h、6h、12h和24h;（3）CCK-8+LPS组:加入终浓度为10^-8mol/L CCK-8 10min后加入LPS 10μg/ml;（4）Pro+LPS组:加入Pro终浓度为2μg/ml,10min后加入LPS 10μg/ml;（5）CCK组:加入终浓度为10^-8mol/L CCK-8。测定细胞上清液中NO、CO和MDA含量,应用分子生物学技术检测ASMC的iNOSmRNA和HO-1mRNA表达。结果与结论:（1）对照组、CCK组ASMC无iNOS mRNA表达;LPS组ASMC的iNOS mRNA明显表达,LPS处理ASMC 4、6、12、24h,iNOSmRNA相对量分别为0.242±0.016:0.498±0.024;O.716±0.033;0.192±O.009。CCK-8可抑制LPS诱导ASMC的iNOS mRNA表达,NO含量的变化趋势与iNOS mRNA表达量相一致。（2）正常对照组、CCK组ASMC无HO-1 mRNA表达;LPS可时间依赖刺激ASMC的HO-1 mRNA表达,LPS作用4h、6h、12h和24h后,ASMC HO-1mRNA相对表达量分别为0.292±0.015、0.492±0.021、0.542±0.032和0.627±0.037。CCK-8可抑制LPS诱导的ASMC的HO-1 mRNA表达,其产物CO含量的变化趋势与HO-1 mRNA表达量相一致。（3）与对照组相比,LPS组ASMC培养液中MDA含量明显升高（P<0.05）;与LPS组相比,CCK+LPS组培养基中MDA含量显著降低（P<0.05）,表明CCK可减轻LPS引起的细胞损伤。在时相上,LPS诱导ASMC HO-1 mRNA的上调高峰晚于iNOS mRNA的上调,提示在整体实验中iNOS基因产物NO可能对休克早期循环紊乱起主要作用,而HO-1 mRNA产物CO在休克较晚期发挥重要作用。CCK抑制LPS诱导的iNOS mRNA、HO-1mRNA的表达,减少其产物NO、CO的含量,这可能是CCK减轻ES时组织损伤和血液循环紊乱的重要机制。更多还原