【作者】 王富荣； 陈青华； 姜立杰； 佟兆国； 章镇； 赵剑波；

【Author】 WANG Furong~1, CHEN Qinghua~2, JIANGLijie~2, TONG Zhaoguo~1, ZHANG Zhen~1, Jiang Lijie~2, ZHAO Jianbo~(2*) (1 College of Horticulture, Nanjing Agricultural University Nanjing 210095; 2 Institute of Forestry and Pomology, Beijng Academy of Agricultural and Forestry Sciences, Beijing 100093)

【机构】 南京农业大学园艺学院； 北京市农林科学院林业果所研究所；

【摘要】 <正> 以南山贡桃、中宁毛桃和白星桃三个桃地方品种的幼叶为材料,分别采用了常规SDS法、常规CTAB法、SDS-CTAB结合法和改良CTAB法对其基因组总DNA的提取效果进行了比较研究。结果表明:常规SDS法提取的DNA虽然产率最高（表1）,三个品种平均达84.141μg·g⁹-1),但由于A₂₆₀/A₂₈₀比值小于1.70,说明蛋白质、酚等杂质没有去除干净;且所提取的DNA呈粘稠状的浅褐色沉淀,难以溶解:琼脂糖凝胶电泳检测结果显示DNA带不及改良CTAB法亮,可能是未去除的多糖类物质影响了紫外分光光度计的定量分析。常规CTAB法和SDS-CTAB结合法提取的桃基因组DNA,A₂₆₀/A₂₈₀比值在2.0左右,虽然蛋白质等杂质去除较干净,但电泳结果显示这两种方法对多糖类物质的去除能力仍然有限,且提取效果重复性较差（图1）;而改良CTAB法提取DNA完整性较好,杂质少,无降解现象,A₂₆₀/A₂₈₀平均比值为1.89,RNA去除干净,能被限制性内切酶完全消化,通过基因组DNA-AFLP指纹图谱分析,完全满足实验要求（图2）。更多还原