拉米夫定治疗的慢性乙型肝炎患者乙型肝炎病毒YMDD基序变异的研究

【作者】 陈发林； 郭永建； 伍严安； 黄毅； 马晓宁； 黄肖利；

【机构】 福建省立医院检验科；

【摘要】 目的探讨拉米夫定治疗1年后慢性乙型肝炎 (CHB)患者发生YMDD基序的变异状况,建立YMDD基序变异的普通PCR结合变性高效液相色谱(DHPLC)检测方法。方法采用荧光定量PCR法检测其血清HBV DNA含量,ELISA法检测血清HBV标志物,速率法检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)含量。采用荧光PCR法和普通PCR结合DHPLC法检测HBV YMDD基序变异。结果61例CHB患者经拉米夫定治疗1年后,其血清 HBV-DNA阳性率降至34．4％(21／61)。共检测出10例野生型和 11例突变型,变异率为18．0％。在11例突变型中,完全突变型7 例(63．6％),部分突变型4例(36．4％)。在完全突变型中,YIDD突变型5例,YVDD突变型2例,分别占变异型总数的45．4％和 18．2％。在部分突变型中,3例为YMDD和YIDD,1例为YMDD和 YVDD,分别占变异型总数的27．3％和9．1％。变异患者组均未出现HBeAb血清学转换,血清HBV-DNA载量为106．58±0．75 (拷贝／ml),明显高于HBV-DNA阳性无变异组(p<0．05),ALT含量 123．8±53．8(U／L),明显高于HBV-DNA阴性无变异组(p<0．01)。经过基因测序法证实,普通PCR结合变性高效液相色谱(DHPLC) 检测方法可检出YMDD变异。结论CHB患者拉米夫定治疗1年后,出现较高的YMDD基序变异率,并伴随着HBV-DNA和ALT 升高。普通PCR结合DHPLC,经济便捷,适用于筛查CHB患者的 YMDD基因变异的常规监测。更多还原