阻断环氧合酶信号对酪氨酸激酶抑制剂抗白血病效应影响的研究

【作者】 吴先国；

【机构】 浙江大学医学院附属二院检验科；

【摘要】 目的探讨阻断环氧合酶信号促进酪氨酸激酶抑制剂STI571的抗白血病效应及其机制。方法以不同浓度的环氧合酶-2(COX-2)抑制剂塞来昔布(celecoxib)与STI571组合孵育K562细胞,光镜、荧光显微镜观察细胞形态,MTT比色法观察两者对细胞的生长抑制情况,流式细胞术作DNA倍体分析及细胞凋亡线粒体流式检测,半定量RT-PCR法分析相关基因的表达。结果(1)celecoxib可促进STI571抑制白血病细胞增殖的能力,0.25μmol/LSTI571与40.0、60.0μmol/L的celecoxib联用抑制率分别为76.1±1.6%、91.5±0.4%,明显高于单药组60.0±2.0%(0.25μmol/LSTI571)、34.7±0.5%(40.0μmol/Lcelecoxib)、49.8±1.8%(60.0μmol/Lcelecoxib)(P<0.05)。(2)单用celecoxib时未检测到细胞凋亡发生,但与STI571联用时可显著增强STI571诱导凋亡的能力,表现为明显凋亡形态学改变,亚G1期细胞及线粒体凋亡百分率显著增高,其中0.25μmol/LSTI571与40μmol/Lcelecoxib联用时分别为20.6±3.6%、31.3±4.3%,高于STI571单药组(亚G1期细胞及线粒体凋亡百分率分别为3.0±0.6%、3.2±0.4%)(P<0.05)。(3)单用celecoxib、STI571对cox-2表达没有影响,而联用则cox-2显著下调(P<0.05),但联用及单用对VEGF表达均没有影响(P>0.05)。结论单用celecoxib仅抑制K562细胞增殖,而联用STI571可明显降低K562细胞对STI571的效应阈值,促进STI571诱导的增殖抑制和凋亡。更多还原