整合素β1基因剔降血管内皮细胞株的建立及其增殖活力的研究

【作者】 梁光萍； 苏踊跃； 陈建； 闫德雄； 陈卫； 王秀亮； 罗向东；

【机构】 第三军医大学西南医院全军烧伤研究所创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室；

【摘要】 目的构建人整合素β1基因的小干扰 RNA(siRNA)表达载体(pGenesill-integrin β1),建立 integrin β1剔降血管内皮细胞株,观察 integrin β1对 EA.hy926细胞株增殖的影响。方法合成 integrin β1 siRNA 模板,经退火后插入到 pGenesil-1荧光载体。阳性重组质粒经 DoTAP 转染至 EA.hy926细胞中。蛋白印迹观察 pGenesill-)integrin β1表达载体对目的蛋白 integrin β1 表达的抑制效率,绘制转染基因前后细胞生长曲线。结果经酶切、测序验证,pGenesil-integrin β1重组质粒构建成功。转染细胞后,可明显抑制 integrin β1的表达。整合素β1基因剔降血管内皮细胞株细胞增殖减慢,与 EA.hy926细胞株相比,生长曲线右移。结论成功构建了 pGenesil-integrin β1重组质粒,建立了 integrin β1下调细胞株,下调 integrin β1表达对血管内皮细胞产生负调控作用。更多还原