缺氧对人脐静脉内皮细胞株增殖与活力的影响

【作者】 梁光萍； 苏踊跃； 陈建； 罗向东； 杨宗城；

【机构】 第三军医大学西南医院全军烧伤研究所创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室；

【摘要】 目的观察缺氧对人脐静脉内皮细胞增殖与活力的影响。方法将体外培养的人脐静脉内皮细胞株 EA.hy926分为常氧组和缺氧组。常氧组常规培养,缺氧组细胞充入混合气体（含体积分数94%N₂、5%CO₂、1%O₂）后置于37℃孵育1、3,6、12 h。提取两组细胞总蛋白,用蛋白质印迹法检测血管内皮生长因子（VEGF）和增殖细胞核抗原（PCNA）的表达水平;流式细胞仪检测细胞周期,并以噻唑蓝（MTT）法检测细胞增殖活力。结果与常氧组比较,缺氧组细胞缺氧1h VEGF 表达增高,6 h 达高峰,12 h 降低但仍明显高于常氧组;缺氧3 h 细胞 PCNA 蛋白表达开始升高,6h 达峰值并持续至12 h。缺氧1～3 h,缺氧组细胞增殖活力值较常氧组明显增高,6 h 开始下降,至12 h 时低于常氧组。缺氧组细胞缺氧1、3、6 h,G0/G1期细胞均较常氧组少,S 期和 G2M 期细胞增多,PI 各为（43±9）%、（39±11）%、（40±11）%,均高于常氧组（32±9）%,其中3、6 h 与常氧组比较差异有统计学意义（P<0.05）;12 h 时 PI 为（27±4） %,降至常氧组水平以下（P<0.05）。结论缺氧早期可促进人脐静脉内皮细胞增殖,但随着缺氧时间的延长,细胞增殖将受到抑制。更多还原