细胞内病毒抗原定位的低温包埋及胶体金标记

【作者】 李光宇； 徐维明； 李颂； 杨喆；

【机构】 中国医学科学院医学生物学研究所；

【摘要】 <正> 本文报告使用低温包埋剂Lowicryl K4M对感染细胞进行低温包埋和制作超薄切片,用包被SPA或IgG的胶体金作为第二抗体,采用间接法对两种RNA病毒（脊髓灰质炎病毒和轮状病毒）和两种DNA病毒(单纯疱疹Ⅰ型病毒及SV₄₀)在感染细胞中作了定位标记实验。将结果同常规环氧树脂Epon 812包埋的感染细胞包埋前穿透标记和包埋后超薄切片标记进行比较。常规包埋法对细胞超微结构保存良好,但由于高温聚合对病毒抗原活性破坏较大,不能获得理想的金标记结果。使用皂角甙（Saponin）改变细胞膜进行包埋前穿透标记,虽能获得特异性标记,但皂角甙对细胞膜结构破坏严重,不利于进行病毒与细胞相互作用关系的研究,且作用条件及时间不易掌握。以上缺点可通过使用低温包埋法得到解决。更多还原