【作者】 张铁鹰； 孙杰； 陈志伟；

【Author】 ZHANG Tieying, SUN jie, CHEN Zhiwei (The state Key Laboratory of Animal Nutrition, Institute of Animal Science, CAAS, Beijing 100094, China; College of Life Science, Shan Dong University of technology, Zibo 255049, China)

【机构】 中国农业科学院畜牧兽医研究所动物营养学国家重点实验室； 山东理工大学生命科学学院；

【摘要】 <正>对于生长阶段的动物,小肠对无机磷的吸收对于维持动物身体正常发育、骨骼矿化和磷的动态平衡尤为重要。动物通过自由扩散和钠依赖型的主动运输两种方式从小肠腔吸收无机磷。处于生长期的仔猪日粮中需要含有大量无机磷,但是生长期仔猪对无机磷吸收的生物学特点尚不清楚。本研究旨在探讨生长期仔猪小肠BBMV对于无机磷摄入的pH和钠离子依赖性,测定无机磷摄入的动力学参数,并与五指山猪做比较,试验结果将为确定适合的生长猪日粮添加量和寻求猪的低磷饲养措施奠定理论基础。试验选取3月龄断奶商品大白猪和五指山猪各6头,饲喂常规日粮。屠宰后剖腹并截取空肠中段,刮下肠黏膜。利用MgCl2沉降和差速离心技术提取小肠上皮细胞刷状缘膜(顶膜)囊泡(brush-border membrane vesicles,BBMV)。在室温条件下,利用32P标记和快速过滤技术在不同的pH和钠离子浓度条件下测定 15s内BBMV对无机磷的摄入量,确定生长猪对于pH和钠离子的依赖性,并且测定大白猪和五指山猪空肠BBMV对无机磷摄入的动力学参数,试验结果表明:(1)通过上述方法成功地提取了仔猪空肠BBMV, 提取物中小肠上皮细胞顶膜的标志酶一一碱性磷酸酶比活力提高10～15倍,而底膜的标志酶—— Na-K-ATP酶活性仅提高3～4倍;(2)pH6．5时仔猪空肠BBMV对无机磷的主动吸收和被动扩散均显著低于pH7．5的测定情况(P<0．05); (3)钠离子水平严重影响BBMV对于无机磷的主动吸收。pH 7．4条件下,Hill系数(napp)为2．07,表明当一个磷酸根被转运时,至少有两个钠离子与其协同转运,磷的最大摄入量的一半时的钠离子浓度([Na]0.5)为71．6mM; (4)在不同的磷浓度(0～2．0mM)和pH7．4条件下,测得3月龄大白猪BBMV对于无机磷吸收的亲和力常数(Km)为0．43±0．09mM。(5)五指山猪磷转运蛋白对无机磷的亲和力与大白猪相似,Km为0．31±0．05mM,说明两个品种猪磷转运蛋白同源性较高;大白猪BBMV对于无机磷吸收的最大转运速度(Vmax)为2．25±0．19 nmol／mg蛋白/15s,五指山猪BBMV 的Vmax为2．5±0．18 nmol／mg蛋白/15s,比大白猪稍高。这可能与两种猪空肠刷状缘膜脂含量和膜流动性或空肠磷转运蛋白分布有关,具体原因还有待于在分子水平做进一步研究。更多还原