SARS冠状病毒S蛋白部分序列2的克隆与表达

【作者】 秦莉； 吴少庭； 王西明； 袁仕善； 雷明军； 潘辉榕； 黄达娜； 高世同； 张仁利； 屈伸；

【机构】 深圳市疾病预防控制中心分子生物室； 华中科技大学同济医学院生物化学与分子生物学系；

【摘要】 <正> 目的:构建SARS冠状病毒棘突蛋白部分序列2(S2)的原核表达质粒,分析其在大肠杆菌中的表达状况。方法:采用逆转录聚合酶链式反应技术从SARS冠状病毒基因组中扩增出编码S蛋白的第2170到2814位碱基的基因片段,克隆至pMD18-T载体,PCR筛选阳性克隆并测序。用限制性内切酶消化后,目的片段亚克隆至表达载体pGEX-4T-2,转化大肠杆菌JM109,PCR和双酶切鉴定转化菌落。将更多还原