Myc/Max与Mad/Max在其靶基因上的转换与HL-60细胞分化相关性的研究

【作者】 姜国胜； 白厚桥； 温培娥； 张玉昆； 唐天华； 任海全； 郭铁军； 毕高峰； 刘佳宁； 杨炜华； 任霞；

【机构】 山东省医学科学院基础医学研究所,山东省医药卫生肿瘤免疫与中药免疫重点实验室,山东省现代医用药物与技术重点实验室,山东省医学科学院血液肿瘤防治研究中心；

【摘要】 目的探讨Myc家族及其靶基因在HL-60细胞增殖与分化中的作用。方法利用全反式维甲酸(ATRA)和小剂量三氧化二砷(As2O3)分别诱导HL-60细胞产生终末分化和部分分化模型,采用WST1方法和NBT还原试验检测药物对细胞增殖和分化的影响,流式细胞仪分析细胞周期变化,Western blot和RT-PCR检测药物处理前后细胞内c-Myc、Mad1蛋白和mRNA的变化,ChIP实验检测Myc与Mad1在靶基因上的结合与调节作用.结果ATRA诱导的终末分化细胞增殖明显受到抑制,细胞周期停滞于G1期,c-Myc蛋白及mRNA表达明显下降,且c-Myc在其靶基因hTERT启动子上的结合消失。As2O3诱导的部分分化细胞仍然具有较高增殖能力,细胞周期变化不明显,c-Myc蛋白及mRNA高表达,c-Myc在其靶基因hTERT启动子上仍具有较高的结合水平。相反,HL-60细胞经ATRA作用后,Mad1 mRNA表达升高,结合靶基因增多。而小剂量As2O3诱导的部分分化模型中,Mad1 mRNA表达水平较低,靶基因结合不明显。结论Myc表达及靶向hTERT有助于阻止HL-60细胞从部分分化到终末分化转换。更多还原