Tie2介导的基因导入系统转导p53基因对肺癌的抑制作用

【作者】 吴向华； 李宗海； 赵瑞皎； 徐宇虹； 李锦军； 姚明； 陈宪莲； 曲淑敏； 钱莲芳； 顾健人；

【机构】 复旦大学附属肿瘤医院肿瘤内科； 上海市肿瘤研究所癌基因及相关基因国家重点实验室； 上海交通大学药学院；

【摘要】 【目的】肺癌是全球肿瘤相关死亡的首要原因.尽管手术、放疗及化疗取得了很大进步,然而大多数病人在就诊时已无法根治,最终死于肿瘤的复发和转移。随着现代分子生物学的进展,肿瘤基因治疗将成为除手术、放疗及化疗外又一新的抗癌策略,尤其在抗肿瘤的复发和转移方面发挥重要作用。本研究观察我们研发的Tie2介导的基因导入系统体内靶向转导p53基因治疗肺癌的效果。【方法】首先应用双功能交联剂将Tie2配体寡肽GA3与PEI的交联构建Tie2介导的GA3基因导入系统;通过DNA阻滞试验确定载体与p53基因比例制备载体基因复合物;Tie2表达阳性的人肺腺癌细胞SPC-A1裸鼠(BALB/c)种植瘤模型的建立;该实验采用4周龄雌性裸数鼠(BALB/c)。人肺癌SPC-A1种植瘤接种于裸鼠皮下,当肿瘤直径达0.4-0.5cm时,挑选肿瘤大小均匀的动物随机分为5组,每组六只。(1)NS;(2)GA3;(3)p53;(4)PEI/p53;(5)GA3-PEI/p53;采用瘤周注射方式,每次治疗用pCEP-p53基因1μg,隔两天一次,并测量肿瘤长(a)短(b)径,待生理盐水组种植瘤表面出现坏死时终止前部分实验;根据公式V=πab2/6计算瘤体积,绘制肿瘤生长曲线,并计算抑瘤率。继续观测并记录动物生存天数,绘制生存曲线;组间比较采用t-test。【结果】GA3-PEI/p53与PEI/p53、p53及生理盐水组相比均能显著抑制肿瘤生长(p<0.05)。根据肿瘤体积计算的抑瘤率结果,发现GA3-PEI/p53治疗组的抑瘤率为61.29%;与对照组相比中位生存期明显延长(p<0.05,图2)。【结论】本实验室所组建的新型受体介导的基因转移系统-GA3基因导入系统通过Tie2受体的高亲和力配体寡肽GA3的靶向作用,能将p53基因靶向导入Tie2受体表达阳性的人肺腺癌SPC-A1细胞及荷SPC-A1裸鼠种植瘤,并显著抑制肿瘤生长,明显延长治疗荷瘤鼠的中位生期。更多还原