TGF-β1在低氧诱导肺血管内皮向平滑肌样细胞转分化中的作用

【作者】 卢玮； 黄磊； 何惠华； 朱朋成； 葛晓娜； 杜惠扬； 敖启林； 孙红蕾；

【机构】 华中科技大学同济医学院病理系； 武汉市中心医院妇产科； 华中科技大学同济医学院附属同济医院心内科；

【摘要】 目的研究低氧条件下肺动脉内皮细胞(PAEC)向平滑肌样细胞的转分化及转化生长因子β1(TGFβ1)在此转分化过程中的作用。方法将经免疫磁珠法(用血小板-内皮细胞粘附分子PECAM-1做免疫分选标记)纯化后的原代肺动脉内皮细胞分别在常氧(含21％O2,5％CO2和 74％N2)和低氧(含1％O2,5％CO2,94％N2)条件下培养1、4、7天,用核酸干扰法(RNAi)阻断TGFβ1的表达,用逆转录-聚合酶链式反应法 (RT-PCR)和Western-blot分别检测各组细胞TGF β1mRNA和蛋白的表达,并用免疫组化法检测平滑肌细胞标志蛋白α-平滑肌肌动蛋白(α-SM- actin)的表达结合形态学观察从而判定有无平滑肌样细胞的转分化。结果低氧可增加肺动脉内皮细胞TGFβ1 mRNA和蛋白的表达(P<0．05), RNAi沉默TGFβ1基因表达后可明显降低其 mRNA和蛋白含量(P<0．05),随着低氧培养时间的延长,肺动脉内皮细胞转分化为平滑肌样细胞的比率逐渐增加(P<0．05);阻断TGFβ1表达后,平滑肌样细胞的转化率明显降低(P<0.05)。结论肺动脉内皮细胞中存在具有转分化为平滑肌样细胞潜能的细胞;低氧可明显促进转分化, TGFβ1在此转分化过程中起重要作用。更多还原