基质金属蛋白酶-26(MMP-26)的克隆、表达及其对乳腺癌生物学行为的影响

【作者】 李玉林； 王阳； 李伟； 李一雷； 邓一平； 王心蕊； 张丽红；

【机构】 吉林大学病理生物学教育部重点实验室；

【摘要】 目的将携带MMP-26全长序列的 pcDNA3．1质粒转染人乳腺癌细胞株MCF-7,进而研究其对乳腺癌生物学行为的影响。方法脂质体法稳定转染MCF-7细胞株,通过单克隆筛选和鉴定获得高表达细胞株;通过体内和体外实验, 检测MMP-26对乳腺癌细胞生物学性状及肿瘤生物学行为的影响。结果 (1)通过RT-PCR筛选 MMP-26 mRNA高表达的阳性克隆,细胞免疫荧光化学染色和流式细胞术证实MMP-26蛋白表达增强,明胶酶谱分析显示MMP-26蛋白的表达包括酶原和活化酶两种形式。(2) MMP-26基因转染后乳腺癌细胞株生物学性状的改变:光镜显示转染后的MCF-7细胞呈现多形性,表现为细胞体积增大,异型性明显,核分裂像增多,出现病理性核分裂像;透射电子显微镜见胞浆内出现糖原池;流式细胞术检测细胞增殖周期,显示MMP-26 转染细胞峰值加宽,S期和G2-M期细胞数量增多。 (3)体外实验显示:MMP-26组细胞在Matrigel 上的铺展、迁移和侵袭能力较对照组明显增强(P <0.01)。(4)体内人乳腺癌细胞株异种移植模型显示MMP-26转染细胞形成的肿瘤间质多,间质血管数量多;体内肿瘤细胞诱导血管生成模型显示MMP-26转染细胞所诱导的血管数量多,管径粗,分支多,交联成网状,与对照组比较血管总长度明显增长(P<0．01)。结论 MMP-26蛋白能使肿瘤细胞恶性表型增加,增殖能力增强,在 Matrigel上的铺展、粘附、迁移和侵袭能力增强; MMP-26能诱导肿瘤血管新生;MMP-26可能成为判断乳腺癌恶性程度,侵袭能力的检测指标之一, 并进而判断乳腺癌患者的预后。更多还原