姜黄素对培养的爪蟾卵母细胞人LDL受体基因表达的影响

【作者】 沃兴德； 范春雷； 钱颖； 卢德赵； 罗艳；

【机构】 浙江中医学院分子医学研究所； 杭州师范学院生物化学教研室；

【摘要】 在实验室中饲养爪蟾,获得稳定的Ⅴ、Ⅵ期卵母细胞,经用1mg/ml胶原酶孵育过夜能除去卵母细胞外层的卵巢膜和滤泡膜,存活率可达95%以上。测定卵母细胞培养液中的LDL—C浓度和用DiI-LDL荧光配体测定膜上结合荧光,发现Ⅴ、Ⅵ期卵母细胞膜上未见有内源性LDL受体,如将人LDL受体的表达质粒p3.7LDL导入爪蟾卵母细胞核中,培养后可检测到由DiI标记的LDL配体所发出的红色荧光,用免疫荧光检测法可发现膜上有绿色荧光,免疫胶体金标记透射电镜检测可见膜上有内吞胶体金颗粒,实验证明外源性的人类LDL受体基因能在爪蟾Ⅴ、Ⅵ期卵母细胞中表达,此LDL受体基因表达系统可用于中药降血脂抗动脉粥样硬化机理的研究。选择0.3μg/ml、0.6μg/ml、0.9μg/ml姜黄素对爪蟾卵母细胞LDL受体基因表达进行干预,实验可见姜黄素可增加LDL受体的基因表达量,并且随浓度增加使其受体表达量增强,具有很好的量效关系。姜黄素能增加爪蟾卵母细胞对LDL受体基因的表达,说明姜黄素可能通过促进LDL受体表达这一途径降低血清胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇和载脂蛋白B-100含量,起到降血脂和抗动脉粥样硬化作用。更多还原