【作者】 赖家业； 刘凯； 石海明； 兰健； 尹承颖； 罗荡平； 冯家勋； 陈放；

【Author】 LAI Jia-ye~(1,2),LIU Kai~1,LAN Jian~1,SHI Hai-ming~1,LUO Dang-ping~1,FENG Jia-xun~3,CHEN Fang~2

【机构】 广西大学国家林业局中南速生材繁育重点实验室； 四川大学生命科学学院； 广西大学教育部亚热带生物资源保护利用重点实验室；

【摘要】 以蒜头果（Malania oleifera）叶片为材料,研究了蒜头果基因组DNA的提取方法及RAPD反应体系的建立和优化。结果表明:采用改良的SDS法提取获得质量较高的蒜头果DNA,并适宜于RAPD分析;初步建立和优化的RAPD反应体系体积为25μl:0.1ng/μl模板DNA,10×buffer2.5μl,2.5mMdNTP1.5μl,10pm/μl引物2μl,10U ExTaq酶0.15μl, ddH₂O17.85μl。最佳反应程序为95℃/7min→95℃/30sec→36℃/30sec→72℃/2.5min（扩增30循环）→72℃/7min。更多还原

【Abstract】 The methods of genetic DNA extraction and the optimization of RAPD analytic conditions were studied in Malania oleifera.The results showed that high grade genetic DNA was obtained by the revised SDS method.The optimal PCR system for RAPD analysis was as follows:2.5μl10×E_x buffer,1.5μl 2.5mM dNTP,2μl 10pm/μl random primer,0.1ng/μl DNA template,0.15μl 10U Ex Taq polymerase in 25μL reaction solution.The program of PCR reaction is 95℃/7min→95℃/30sec→36℃/30sec→72℃/2. 5min(30cycles)→72℃/7min.更多还原