Lewis y抗原增加卵巢癌细胞系RMG-I对多西紫三醇的耐药性

【作者】 张帆； 林蓓； 赵越； 郝莹莹； 李飞飞； 刘娟娟； 张淑兰；

【机构】 中国医科大学附属盛京医院妇产科；

【摘要】 目的:我们在前期的实验中证明Lewis y抗原增加卵巢癌细胞系RMG-I对5-氟脲嘧啶（5-fluorouracil,5-FU）的耐药性（Cancer Sci,2005,96（1）:26～30）,但是目前卵巢癌化疗一线化疗方案为紫三醇联合铂类化疗,所以,本次实验继续应用我们已经建立的Lewis y抗原高表达细胞模型,研究Lewis y抗原与紫三醇耐药的关系。方法:将含有α1,2-岩藻糖苷酶（α1,2-fucosyltransferase,α1,2-FT）基因质粒及空质粒分别转染入卵巢癌细胞株RMG-1后获得Lewis（y）抗原稳定高表达细胞株RMG-1-pcDNA3.1-FUT和细胞株RMG-1-pcDNA3.1。利用免疫细胞化学方法观察转染前后细胞表面Lewis（y）（Le^Y）抗原的表达,利用四甲基偶氮唑盐（MTT）法测定不同浓度多西紫三醇作用后细胞系RMG-1-pcDNA3.1-FUT及其对照组RMG-I、RMG-1-pcDNA3.1的细胞生长抑制率（IR）:利用流式细胞仪（FCM）分析细胞凋亡,同时检测药物作用后细胞的凋亡坏死比率;利用荧光染色法和透射电镜进一步观察细胞凋亡状态。结果:RMG-1-pcDNA3.1-FUT的半数抑制浓度(IC₅₀)为7.980±1.311μg/ml明显高于对照组RMG-I（4.764±1.421μg/ml）和RMG-1-pcDNA3.1 （4.597±1.176.μg/ml）的IC₅₀（P均<0.05）,而后两者间无统计学差异（P>0.05）;经流式细胞仪分析,证实细胞存在凋亡;经10μg/ml多西紫三醇处理后细胞再进行流式细胞仪检测,RMG-1-pcDNA3.1-FUT的相对凋亡率分别为65.29%,明显低于对照组RMG-1-pcDNA3.1（83.67%）和RMG-I（82.22%）,（P<0.05）,后两者间比较无统计学差异（P>0.05）;而荧光染色和透射电镜直接观察了细胞形态变化,每个浓度组RMG-1-pcDNA3.1-FUT的凋亡程度均低于RMG-I和RMG-1-pcDNA3.1。结论:证明表面Lewis（y）抗原含量增加的同时,卵巢癌细胞对多西紫三醇的耐药性增强。更多还原