黑曲霉内切菊粉酶基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

【作者】 蒋思婧； 马立新；

【机构】 湖北大学生命科学院分子微生物学与基因工程研究室；

【摘要】 <正> 菊粉是许多植物(如菊苣,菊芋,大丽花等)块茎中的贮藏性多糖,它是果糖通过β-2,1糖苷键连接而成、末端有一个蔗糖单元的果聚糖。菊粉酶(广泛存在于细菌、酵母、真菌中)能专一性水解菊粉,根据作用方式不同,可分为内切菊粉酶和外切菊粉酶两类。内切菊粉酶(2.1--D-fructan fructanohydralase EC,3.2.1.7)将菊粉水解为果寡糖,可用于制备低聚果糖。 低聚果糖(聚合度为2-15)是双歧因子,能促进入肠道健康菌群—双歧杆菌的生长,清洁肠道,有益人体健康。利用微生物高产比活性高的内切菊粉酶是利用菊粉原料工业化制备低聚果糖的关键。 本研究根据已报道的黑曲霉内切菊粉酶的基因序列,设计了一对引物,Primer1:5’更多还原