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基于Cre/LoxP系统的Smad2条件基因剔除小鼠的建立
【作者】 周江； 程萱； 孙彦洵； 吕娅歆； 程静； 黄培堂； 黄翠芬； 杨晓；
【机构】 军事医学科学院生物工程研究所；
【摘要】 <正> Smads家族是最新发现的TGF-β信号转导途径中一个重要的新基因家族,它们可以直接将TGF-β信号从细胞膜转移到细胞核内。TGF-β信号分子通过跨膜苏氨酸、丝氨酸激酶受体复合体进行信号转导。SMAD2属于受体激活的SMADs,Smad2的基因位于18q21上,靠近Smad4的基因;此基因包含12个外显子。Smad2在某些散发性肿瘤中,如胰腺癌、结肠癌、肺癌,发生突变,说明它是一种可能的肿瘤抑制基因,纯合Smad2基因剔除小鼠的胚胎在E6.5天死亡。为了进一步研究Smad2在成体各组织器官及肿瘤发生中的可能作用,我们利用Cre-LoxP系统构建了Smad2条件基因剔除载体,将LoxP置于Smad2基因组序列C末端功能域两侧,并在组成型表达Cre重组酶的大肠杆菌中检测了LxoP位点的有效性。 在利用该打靶载体对ES细胞进行电击转化前,首先要制备G418抗性的小鼠胚胎干细胞滋养层用于ES细胞的培养和筛选。我们利用一个neo基因成功整合到基因组的小鼠品系
- 【会议录名称】 中国生物工程学会第三次全国会员代表大会暨学术讨论会论文摘要集
- 【会议名称】中国生物工程学会第三次全国会员代表大会暨学术讨论会
- 【会议时间】2001
- 【分类号】Q953
- 【主办单位】中国生物工程学会