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氨基功能化纳米磁性粒子的制备和表征及其在固定化木瓜蛋白酶中的应用

Preparation and Characterization of Amino-group Functionalized Magnetic Nanoparticles and its application on immobilizing papain

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【作者】 吴文兵王显祥单志杨婉身

【Author】 Wu Wen-bing~(1,2) Wang Xian-xiang~1 Dan zhi~1 Yang Wan-shen~(*1) (1.College of Life Science,Sichuan Agricultural University,Ya’an,Sichuan,625014;2.Department of Environmental Science,Kashgar Teacher’s College,Kashgar,Xingjiang,844000)

【机构】 四川农业大学 生命科学与理学院喀什师范学院生命与环境科学系

【摘要】 在共沉淀法制备油酸包被的 Fe3O4的基础上,用分散聚合法合成了一种表面富含氨基功能基团的磁性粒子,电位滴定结果表明,氨基磁性粒子表面氨基基团含量达486μmol/g 微球。利用透射电镜、X 射线衍射仪、振动样品磁强计和傅立叶变换红外光谱仪对磁性微球进行了表征,表明合成出的氨基磁性纳米粒子磁响应性强、粒度小、离径分布窄。用该磁性微球固定化了木瓜蛋白酶,固定化最佳条件为给酶量1.2mg/mL,戊二醛浓度5%,固定化时间 4小时;固定化酶较溶液酶具有更低的 Km 值(0.489%:3.412%),更好的酸碱(6.8:7.2) 和温度耐受性(77℃:67℃),操作和储藏稳定性也得到了很大提高。

【Abstract】 The oleic acid coated Fe3O4 was prepared by chemical coprecipitation method first, then amino-group Functionalized magnetic nanoparticles was synthesized by dispersion polymerization.Electrometric titration result indicated that,the surface amino group of magnetic microsphere reached 486μmol/g.The magnetic nanoparticles were characterized by means of transmission electron microscope (TEM),X-ray diffractometer (XRD),Vibrating Sample Magnetometer (VSM) and Fourier Transform Infrared Spectrometer (FTIR).The amino microsphere was applied to immobilized papain.The optimal immobilization condition is that: 1.2mg/ml for proportion of enzyme,5% for concentration of glutaraldehyde and 4 hours for immobilization time.Compared to free enzyme immobilized enzyme had lower Km (0.489%: 3.412%),better tolerance of acid base (6.8:7.2) and temperature (77℃:67℃),the stability of manipulation and preservation enhanced greatly too.

  • 【会议录名称】 中国生物化学与分子生物学会农业生物化学与分子生物学分会第八次学术研讨会论文集
  • 【会议名称】中国生物化学与分子生物学会农业生物化学与分子生物学分会第八次学术研讨会
  • 【会议时间】2008-10
  • 【会议地点】中国云南昆明
  • 【分类号】Q814.2
  • 【主办单位】中国生物化学与分子生物学会
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