一种微生物多糖絮凝剂的制备及组成分析

【作者】 黄俊； 栾兴社； 王世立；

【机构】 山东省医学科学院医药生物技术研究中心； 山东建筑大学环境学院；

【摘要】 目的:制备微生物絮凝剂并分析其组成成分。方法:1、絮凝剂的制备:取分离菌种发酵,发酵液5000rpm离心5min弃沉淀,上清加入2.5倍乙醇,静止30min后,5000rpm离心5min,沉淀用75%乙醇洗至无还原糖反应,用温水溶解,Sewage法除游离杂蛋白多次,水上相加2.5倍乙醇,静止30min,5000rpm离心5min,沉淀用温水溶解。经DEAE—Sepharose FF、Sephadex G—200获得纯化样品。2、絮凝剂组成分析:质谱测定纯化样品的分子量;苯酚—硫酸法测定多糖含量;紫外扫描确定特征吸收峰;红外光谱进一步分析结构;毛细管电泳分析单糖组成。结果:质谱测得分子量约为3.89×10~6Da;苯酚—硫酸法测定多糖含量约占95%;紫外扫描确定其特征吸收峰在250nm;红外光谱分析在3423.21cm~-附近有O—H伸缩振动的强吸收峰,1627.02cm~-附近和1136.44cm~-附近均有C=O的伸缩振动峰,1400.76cm~-附近有C—H键的变角振动,1775～1735cm~-之间无吸收峰,说明无乙酰酯,1250～950cm~-有强吸收峰,表明其为吡喃单体,890cm~-处无特征吸收峰,表明含β—型糖苷键;毛细管电泳分析其含葡萄糖、鼠李糖、苷露糖、半乳糖,比例为13.78:3.91:1.48:1.00。结论:研究发现该微生物絮凝剂的主要组成成分为多糖。更多还原