基于凝胶蛋白组学在胆管癌中的应用

【作者】 练惠辉； 李文岗； 韩鹏； 邱乒乒； 戴燕燕； 陈清西；

【机构】 厦门大学生命科学学院,细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室； 福建医科大学附属厦门第一医院；

【摘要】 胆管癌(Cholangiocarcinoma)是一种恶性高、难于早期诊断和治疗的恶性肿瘤。从世界范围看,胆管癌占所有人类胃肠道肿瘤的3%,是第二种多见的原发性肝癌。本研究为筛选胆管癌癌变的标志物,开发相应的药物研究,建立胆管癌血清双向凝胶电泳技术,摸索和优化了电泳条件。通过对胆管癌血清双向电泳的样品处理、pH范围、上样量的选择、泳参数的设置和SDS凝胶电泳染色方法等进行了优化,特别地比较了Montage Albumin Deplete kit和Proteoextract Albumin/IgG Revoval Kit对血清的处理效果,研究结果表明样品预处理后通过merck公司推出的ProteoExtract Albumin/IgG Removal Kit去除血清中高丰度的白蛋白和IgG,再经丙酮沉淀,用裂解液溶解后,采用pH 3.5～10与pH 5～8的两性载体电解质以体积比1:4混合使用,100μg上样量,12.5%的SDS-PAGE胶,16mA/胶进行双向电泳的电泳体系,得到了分辨率较好的胆管癌血清的蛋白图谱。通过质谱鉴定发现了CK1,CK10等角蛋白及Annexin v在胆管癌中存在高表达,为进一步的研究奠定了基础。更多还原