C57小鼠肝脏质膜蛋白质组学分析

【作者】 李选文； 张丽军； 曹佳； 王细娥； 魏颖娟； 彭霞； 金琦慧； 熊继先； 孙亚兰； 陈平； 梁宋平；

【机构】 湖南师范大学生命科学学院；

【摘要】 <正> 肝脏的细胞质膜作为细胞内外物质与信息交换,以及细胞内外因子识别的靶标所在场所,在肝脏细胞生命活动中发挥着重要作用。本研究采用两种策略分离得到C57小鼠肝脏细胞质膜。方法之一:采取小鼠肝门静脉原位灌流急性分离肝细胞,对分离的肝实质细胞采用生物素亲和纯化方法提取细胞质膜,经电镜观察表明提取的细胞质膜含有大的膜片段,没有囊泡形成。Western blotting分析表明生物素亲和纯化后质膜标志性蛋白质caveolin、flotillin-1及Na+/K+-ATPase均得到了富集,而经过高盐高pH洗涤后,胞质特异性蛋白质actin几乎能完全除去。对提取的细胞质膜蛋白质进行更多还原