乳小鼠培养肝细胞蛋白质双向电泳技术的建立及初步分析

【作者】 宋杰； 何涛； 段承刚； 谢华福； 刘晓燕； 李娟； 甘淋；

【机构】 泸州医学院分子生物学实验室；

【摘要】 <正> 目的:双向电泳是目前分辨率最高的电泳技术,建立和完善各种组织细胞在不同生理、病理条件下的双向电泳技术,是进行蛋白质组分析的前提条件。本实验以分离的乳小鼠肝细胞进行原代培养,建立培养乳小鼠肝细胞蛋白质的双向电泳技术,为研究肝脏在个体发育中特异性蛋白的表达及分子标记奠定基础。方法:取乳小鼠肝脏组织制成肝细胞悬液,按3⁵×10⁵个细胞/ml的密度接种于培养瓶内,置于CO₂培养箱中培养。待细胞培养至对数生长期后,加入细胞裂解液,提取肝细胞蛋白,用Broadford法测得蛋白样品浓度。采用PH 4-7的IPG预制干胶条胶内上样方式,以固相PH更多还原