一种在生理条件下简便、快速的测定脱氧核酶切割RNA反应的动力学参数的方法

【作者】 刘彬； 王雪丽； 张华利； 张今； 李正强；

【机构】 吉林大学分子酶学工程教育部重点实验室；

【摘要】 <正> 脱氧核酶(DNAzyme,Dz)是一类具有催化功能的DNA分子。自Breaker(1994)和C产uenoud(1995)首先报道其序列和功能以来,由于其本身具有的诸多优点,关于Dz结构与功能的研究逐渐成为分子工程学研究领域和新药研发领域的热点问题。与脱氧核酶的广泛应用密切相关的技术问题是如何能够快速、准确且高通量的研究其动力学性质。目前,在所有脱氧核酶反应动力学的研究方法中,应用最为广泛的有两种方法:一种是基于放射性底物标记的放射性影像法;另一种是以荧光染料作为寡核苷酸底物内源标记的荧光共振能量转移法。但这两种方法都存在一定缺陷,具体的说前者易造成放射性污染且需利用聚丙烯酰胺凝胶分离底物与产物,而后者成本昂贵且内源探针的使用有可能影响反应的动力学。更多还原