几种蛋白质含量测定方法的比较研究

【作者】 甘淋； 何涛；

【机构】 泸州医学院中心实验室；

【摘要】 <正> 目的:蛋白质的定量测定是蛋白质组研究的一个基本而重要的环节。由于不同组织、不同细胞中蛋白质的种类及含量具有明显的差异性,故对蛋白质含量的测定方法也各有不同的要求。如何针对不同的组织细胞选择一种适合、简便、快速、灵敏的蛋白质含量测定方法就成为双向电泳之前需首先解决的问题。本研究比较了三种较为常用的蛋白质含量测定方法:Bradford法、Lowry法和Bio-rad DC法分别对培养的小鼠肝细胞、神经元细胞的双向电泳蛋白质样品进行测定的结果。方法:用含0.02%EDTA的0.25%的胰酶分别收集培养瓶中的小鼠肝细胞和神经细胞,1500rpm离心后取细胞沉淀,按1:5的比例加入细胞裂解液,4℃,12000rpm,离心1h裂解细胞,上清液即为肝细胞和神经细胞蛋白质,-70℃保存。更多还原