多发性硬化患者脑脊液蛋白质组的初步研究

【作者】 刘师莲； 祁维平； 刘贤锡；

【机构】 山东大学医学院医学分子生物学实验中心；

【摘要】 <正> 目的:建立用于脑脊液蛋白分离的双向电泳技术体系,探讨从脑脊液中提取蛋白的理想方法,并进行蛋白定量、分离及检测,最终寻找多发性硬化患者和对照组脑脊液蛋白质差异,从蛋白质水平探索多发性硬化患者脑脊液组份的变化规律及其发病机制。方法:(1)取多发性硬化患者和对照组脑脊液各500μl,分别加入0.05g TCA,混匀后冰上放置1h。然后12000r4℃离心10min,弃上清,沉淀用氮气吹干。乙醚:乙醇混合液(1:1,v/v)洗沉淀2次,充分干燥。向提取的蛋白质样品中加入裂解液(尿素8M、CHAPS4%、Pharmalyte pH 3-10 2%),使蛋白质充分裂解。(2)用Bradford方法为蛋白质定量。更多还原