利用一种新型通用探针实时定量PCR检测转基因产品

【作者】 张大兵； 张远莉； 李文全； 陈建群； 彭于发； 曹卫；

【机构】 上海市农业科学院农业遗传育种重点实验室生物技术中心； 复兴实业有限公司技术部； 中国农科院植物保护研究所；

【摘要】 <正> 本文报道了一种利用通用模板信号扩增技术(UT-PCR)探针的实时定量PCR检测转基因产品的方法。UT-PCR引物的5’端可以和UT探针的通用序列结合,3’端是特异的靶基因引物序列。UT-PCR检测转基因产品有以下优点,首先,利用相同的UT探针可以检测不同的靶基因序列,降低实际定量PCR检测的成本,在本文中检测Cry IA(b)、改造的Epsps、Invertase 1、Lectin、35S-Epsps和Gox等6个基因,可以同时用一个UT探针。另外,UT探针经过不同荧光标记后,可用于复合定量PCR检测。且UT-PCR对靶基因序列的长度要求不高,本文实验中最短的检测的靶基因Cry IA(b)的扩增长度为56bp。因此,该方法非常适合于DNA高度降解的深加工转基因产品的检测。通过对Event 176中CryIA(b)等基因的TaqMan PCR和UT-PCR的检测更多还原