高发胰腺癌的SV40-Tag转基因小鼠模型的建立

【作者】 孙强； 朱洪； 谢夏阳； 张静； 孙怀昌； 李厚达；

【机构】 扬州大学比较医学中心；

【摘要】 目的建立高发肿瘤的转基因小鼠模型。方法(1)采用转基因技术,将外源基因SV40Tag注射到小鼠原核内,构建肿瘤转基因小鼠模型;(2)通过外观、大体解剖作发瘤情况观察(3)PCR、Southern Blot检测。(4)组织病理切片、免疫组化研究和观察转基因小鼠模型。(5)采用卵巢移植、超排、胚胎移植和体外受精技术研究SSV40Tag转基因的繁殖与保种技术。结果(1)实验中获得4只PCR阳性检测转基因小鼠,显微注射外源基因整合阳性率7.3%;(2)G0代及其F1～F4代共72只转基因小鼠发生了肿瘤。所有4周龄剖的小鼠在胰腺上均可见点状针头大小肿瘤结节。所有发癌小鼠死亡时间均在98±10d(3)发瘤小鼠均表现为PCR检测阳性的杂合子肿瘤率100%、SouthernBlot检测阳性;(4)经大体解剖和组织病理学观察证明该肿瘤为胰腺癌或胰腺癌并发前列腺癌。(5)经免疫组化检测不仅在胰腺、前列腺的细胞表面可见SV40Tag表达阳性的蛋白,另外在肝脏、肾脏、乳腺、下颌腺均可见SV40Tag表达阳性的蛋白。说明SV40Tag蛋白是广泛表达的蛋白。(6)没有母鼠能生育正常后代,公鼠可能有生育力,但腹围膨大后,通常失去繁育能力,因此繁殖保种困难。(7)本研究已建立卵巢移植与超排、胚胎移植的繁殖保种技术,体外受精技术未能获得正常、正常健康后代。结论证实转SV40TAg基因的小鼠可作为高发肿瘤的动物模型。更多还原