人T-bet基因的表达、纯化及其多克隆抗体的制备

【作者】 杨敏； 王锁英； 许小朋； 马洁； 毛朝明； 仝佳； 邱谷风； 胡正军； 王胜军； 邵启祥； 许化溪；

【机构】 江苏大学医学技术学院检验医学研究所免疫研究室； 江苏大学附属医院儿科；

【摘要】 <正>目的:利用载体pQE30在大肠埃希菌(M15)原核表达人T-bet基因全长序列,并对表达产物进行纯化、免疫动物和制备多克隆抗体,为进一步研究T-bet的生物学功能奠定坚实的基础。方法:利用PCR技术从克隆载体pGEM-T／T-bet获得人T-bet的全长编码序列1607bp,并将其亚克隆至原核表达载体pQE30,形成重组表达质粒pT-bet;酶切鉴定挑选阳性重组质粒转化大肠埃希菌JM109,测序更多还原