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小鼠巨噬细胞移动抑制因子(MIF)的基因克隆及序列分析
【机构】 山东大学医学院实验核医学研究所；
【摘要】 <正> 目的:获得小鼠巨噬细胞移动抑制因子(MIF)全长克隆。方法:1.用TRIzol一步法提取BALB/c小鼠脾脏组织总RNA,进行1%甲醛变性琼脂糖凝胶电泳。设计MIF基因特异引物P1、P2,并进行同源性分析。以P1、P2为引物,利用RT-PCR技术克隆MIF基因。2.用PCR纯化回收试剂盒,纯化回收PCR产物,选择可以直接克隆PCR产物的载体pMD18-T载体为克隆载体,构建重组克隆质粒pMD18-MIF,并转化感受态大肠杆菌DH5a,用蓝白斑法筛选,挑取白色菌落,扩增后经PCR,限制性内切酶BamHI、HindIII双酶切,及SacI单酶切筛选阳性克隆。3.用通用引物对PCR及酶切鉴定阳性的重组克隆进行序列分析。
- 【会议录名称】 山东免疫学会、山东微生物学会医学微生物学专业委员会、山东省医学会微生物学和免疫学专业委员会、山东省医药生物技术学会2001年学术年会论文汇编
- 【会议名称】山东免疫学会、山东微生物学会医学微生物学专业委员会、山东省医学会微生物学和免疫学专业委员会、山东省医药生物技术学会2001年学术年会
- 【会议时间】2001-12
- 【会议地点】中国济南
- 【分类号】R346
- 【主办单位】山东免疫学会、山东微生物学会医学微生物学专业委员会、山东省医学会微生物学和免疫学专业委员会、山东省医药生物技术学会