唐鱼卵黄蛋白原的ELISA检测及其应用

【作者】 姚静； 方展强；

【机构】 华南师范大学生命科学学院广东省高等学校生态与环境科学重点实验室；

【摘要】 以卵黄脂磷蛋白（lipovitellin,Lv）抗血清为抗体,以纯化的Lv作为抗原建立间接酶联免疫吸附反应（ELISA）方法检测雄性唐鱼（Tanichthys albonubes）整体匀浆液中的卵黄蛋白原（vitellogenin,Vtg）。结果表明,该方法的检测灵敏度为8.1 ng/mL,批内误差为8.59%,批间误差为6.28%,工作范围为3.26～209.25 ng/mL。在该范围内,标准曲线具有良好的线性和重复性。由于该方法可直接在1块或在不同的酶标板上准确地进行比较,因而可利用ELISA方法测定经17-β雌二醇（E₂）和不同浓度DDTs暴露21d诱导的雄鱼整体匀浆液中的Vtg含量。结果显示,经0.055 mg/mL E₂诱导的雄鱼整体匀浆液中Vtg含量为4148.33μg/g;当暴露DDTs浓度为0.0275 mg/mL、0.0137 mg/mL和0.0067 mg/mL时,雄鱼整体匀浆液中Vtg含量分别为1109.43μg/g、911.16μg/g和1322.79μg/g,与丙酮溶剂对照组462.79μg/g比较存在显著性差异（p<0.05）。更多还原