白腐菌漆酶基因的克隆及其在酵母中的表达研究

【作者】 张银波； 江木兰； 胡小加； 马立新；

【机构】 中国农业科学院油料作物研究所； 湖北大学分子微生物学与基因工程研究室；

【摘要】 <正> 利用漆酶铜离子结合区的氨基酸序列高度保守的特点设计简并引物,综合运用RT-PCR、cDNA末端快速扩增、基因组步行等分子生物学技术,分别从平菇、黑木耳、金针菇和灵芝4种白腐菌菌中克隆到4个漆酶基因的全长cDNA和两个全长漆酶结构基因,将这4个cDNA分别命名为lccPo1、lccAa、lccFv和lccGl并将其序列提交GenBank,登录号分别为AY450404、AY450405、AY450406和AY485829;两个结构基因分别命名为glccFv和glccGl,其序列提交GenBank,登录号分别为AY485826和AY485825。本文于国内外首次报道了利用基因组步行技术来进行漆酶基因的克隆,并首次从金针菇和灵芝中克隆到全长的漆酶基因和其对应的全长cDNA,且实现了异源表达。以下是对lccPo1、lccFv和lccAa三个漆酶基因所进行的表达及重组漆酶的酶学性质的研究:更多还原