可溶性HLA-A2-肽复合物的体外折叠与生物素化

【作者】 翁秀芳； 陈浩； 吴雄文； 梁智辉； 韩军艳； 黄亚非； 龚非力；

【机构】 华中科技大学同济医学院免疫学系；

【摘要】 目的:可溶性HLA-A2-抗原肽复合物的体外折叠复性与生物素化。方法原核高效表达的HLA H链及β₂m,在抗原肽（EB病毒的膜潜伏蛋白LMP2A的NH₂-CLGGLLTMV-COOH残基）的存在下,通过稀释复性折叠成HLA-A2-抗原肽复合物,并在BirA酶的作用下进行生物素化,使生物素结合到HLA-A2-抗原肽复合物中的H链C端。利用特异单抗（W6/32和兔抗人β₂m抗体）及链霉亲合素进行ELISA和Western blot,检测稀释复性和生物素化的折叠产物。结果折叠复合物中,主要含有HLA H链聚合体、HLA-A2-肽复合物单体及β₂m 3种成分,其中H链聚合体与HLA-A2单体可生物素化。结论成功地获得生物素化的HLA-A2-抗原肽复合物单体,为进一步构建四聚体及制备人工抗原提呈细胞奠定了基础,也为过程复杂的HLA-抗原肽四聚体制备提供了可行的免疫学监控方法。更多还原