FMDV VP1表位肽在烟草坏死病毒A中的表达效率与稳定性

【作者】 张永亮； 李江； 蒲恒； 靳津； 张晓峰； 韩成贵； 于嘉林； 李大伟；

【机构】 中国农业大学农业生物技术国家重点实验室；

【摘要】 烟草坏死病毒 A 中国大豆分离物(Tobacco necrosis virus A Chinese isolate,TNV-A~C)是烟草坏死病毒 A 的一个新株系,球形病毒粒子的直径约28nm,可以侵染8科29种植物。本实验室在获得 TNV-A~C 侵染性 cDNA 克隆的基础上,将口蹄疫病毒(Foot-and-mouth disease virus,FMDV)VP1上长度不等的不同表位肽,分别融合在 TNV-A~C 外壳蛋白(CP)的 C 末端,构建了10个重组侵染性 cDNA 克隆。将重组侵染性 cDNA 克隆体外转录后,分别接种苋色藜(C.amaranticolor),除 FT7(含 VP1 的97～116aa)产生症状较晚且病斑数目减少外,其余所产生的枯斑与野生型病毒没有明显的区别; 体外转录物分别接种本生烟(N.benthamiana)后,FT1、FT4、FT5和FT6(含 VP1不同表位肽段)只侵染接种叶,不能系统移动;而 FT3、FT7、FT8、FT9(含 VP1不同表位肽段)、FB(含 B 细胞表位肽)以及 FBT(同时含有 T 和 B 细胞表位肽,共融合了46个氨基酸残基)能产生系统侵染症状,其中 FT7产生的症状相对稍弱,FBT 只能在部分上位叶上观察到系统侵染症状。更多还原