偶氮还原酶AZR的结构与定点突变研究

【作者】 柳广飞； 周集体； 王竞； 吕红； 金若非；

【机构】 大连理工大学环境与生命学院；

【摘要】 偶氮染料的生物脱色降解为人们研究的热点。偶氮还原酶在细菌脱色偶氮染料的过程中发挥关键作用。利用同源建模法构建了来自 Rhodobacter sphaeroides 的偶氮还原酶 AZR 的三级结构模型,表明其为一种/型结构的黄素氧化还原蛋白。两类依赖黄素的偶氮还原酶的三级结构对比表明它们具有高度的相似性。在序列对齐和结构对比分析的基础上,对保守位点 K¹⁰⁹进行定点突变 K109A 和 K109H 的研究。酶活考察表明,第109位正电荷残基对染料甲基红的结合有重要影响;而 K109H 对 NADPH 的结合并非保守突变。K¹⁰⁹可能只参与 NADPH 的磷酸基团的结合,而对 NADH 的结合无影响。更多还原