节点文献
番茄抗黄瓜花叶病毒病基因转移的研究
【作者】 徐丽； 张胜利； 张建； 陈颖； 王兴智； 朱筱娟； 梁秀梅；
【机构】 吉林省蔬菜花卉科学研究所； 内蒙古呼伦贝尔学院；
【摘要】 本研究利用携带双元载体质粒pTOK233(含有GUS报告基因和卡那霉素抗性基因NPTⅡ)的根癌农杆菌菌株LBA4404,用子叶为外植体,以GUS基因瞬时表达效果为指标,建立优化了番茄高效转化体系。外植体大小对愈伤组织的形成有显著影响,相对小的外植体利于愈伤的形成。光照培养比暗培养更利于愈伤组织的形成。当农杆菌侵染外植体浸泡时间为8-10分钟,菌液浓度OD600约为0.15,稀释液pH=5.0,乙酰丁香酮使用浓度为50μmol/L,以及共培养时间为两天时获得了最高的转化效率。以建立的转化体系,将农杆菌LBA4404携带的CMV-RNA2基因导入番茄子叶,获得了抗黄瓜花叶病毒(cucumber mosaic virus,CMV)病的番茄转基因植株。转化的番茄植株田间试验显示,转化植株抗100 mg/L的卡那霉素。将转基因番茄进行分子生物学鉴定,证明外源基因已整合到转化植株中。
【关键词】 番茄；
根癌农杆菌；
β-葡糖醛酸酶基因(GUS基因)；
黄瓜花叶病毒复制酶基因(CMV-RNA2基因)；
- 【会议录名称】 蔬菜分子育种研讨会论文集
- 【会议名称】蔬菜分子育种研讨会
- 【会议时间】2004-06
- 【会议地点】中国北京
- 【分类号】S641.2
- 【主办单位】中国园艺学会蔬菜专业委员会、中国农业科学院蔬菜花卉研究所