花色苷通过PPARγ-LXRα-ABCA1信号通路促进小鼠巨噬泡沫细胞胆固醇外流

【作者】 夏敏； 凌文华；

【机构】 中山大学公共卫生学院(中山大学预防医学研究所)；

【摘要】 目的花色苷是植物化学物中的重要一类,本研究观察花色苷对小鼠腹腔巨噬泡沫细胞胆固醇外流以及核受体信号通路 PPARγ-LXRα-ABCA1的影响,探讨花色苷调节胆固醇外流的作用及其作用的分子机制。方法制备氧化低密度脂蛋白(oxLDL),以50 μg/mL oxLDL 培养小鼠腹腔巨噬细胞24 h形成巨噬泡沫细胞。将巨噬泡沫细胞分别用1 μM、10 μM、100 μM矢车菊定-3-葡萄糖苷 (cyanidin-3-glucoside,Cy-3-g)和芍药定-3-葡萄糖苷(peonidin-3-glucoside,Pn-3-g)培养24 h, 酶学荧光法检测培养液中胆固醇含量。采用定量 PCR 法检测三磷酸腺苷结合盒转运体 A1 (ABCA1)、肝脏 X 受体(LXRα)和过氧化物酶体增殖物激活受体(PPARγ)mRNA 的表达。采用报告基因和 ELISA 法的方法分别检测 LXRα和 PPARγ的转录活性。用 ABCA1特异性阻断剂 4,4’-二异硫氰酸二丙乙烯-2,2’-二磺酸(DIDS,400 μM)与1 μM、10 μM、100 μM Cy-3-g 或 Pn-3-g 共同培养巨噬泡沫细胞24 h,酶法检测培养液中胆固醇含量。用 LXRα抑制剂(GGPP,10 μM)和 PPARγ抑制剂(GW9662,10 μM)分别与1 μM、10 μM、100 μM Cy-3-g 或 Pn-3-g 共同培养巨噬泡沫细胞24 h,采用定量 PCR 方法检测 ABCA1 mRNA 的表达,酶法检测细胞培养液中胆固醇含量。结果 (1)花色苷 Cy-3-g 和 Pn-3-g 能够促进巨噬泡沫细胞胆固醇外流,这一作用存在时间和剂量-依赖关系。(2)花色苷 Cy-3-g 和 Pn-3-g 能够促进巨噬泡沫细胞 ABCA(?)mRNA 的表达。ABCA(?) 抑制剂 DIDS 阻断 ABCA(?)的表达可以抑制花色苷诱导巨噬泡沫细胞胆固醇外流。(3)花色苷 Cy-3-g 和 Pn-3-g 能够促进巨噬泡沫细胞 LXR α和 PPARγ mRNA 的表达以及增加 LXR α和 PPAR γ的转录活性。LXR α抑制剂 GGPP 和 PPAR γ抑制剂 GW9662能分别阻断花色苷诱导 ABCA(?)mRNA 表达和胆固醇的外流。说明花色苷对 ABCA(?)的调控依赖于 PPAR γ-LXR α信号通路。结论花色苷 Cy-3-g 和 Pn-3-g 通过调节核受体 PPAR γ-LXR α-ABCA(?)信号通路从而促进巨噬泡沫细胞胆固醇外流。更多还原