槲皮素酒精性肝损伤的防护作用及其与Ⅰ型血红素氧化酶关系的研究

【作者】 刘爽； 姚平； 宋毅； 许四元； 李骏； 刘烈刚；

【机构】 华中科技大学同济医学院公共卫生学院营养与食品卫生学系； 湖北省疾病预防控制中心卫生监测检验防护所；

【摘要】 目的研究槲皮素对大鼠原代肝细胞酒精性氧化损伤的防护作用及其与Ⅰ型血红素氧化酶 (HO-1)的关系。方法用二步胶原酶技术分离培养大鼠原代肝细胞。以100 mmol/L 无水乙醇作用大鼠原代肝细胞 8 h 作为肝细胞酒精损伤模型。分别在肝细胞经100 mmol/L 无水乙醇染毒前2 h、染毒后2 h 及染毒同时,用50μ mol/L 槲皮素作用,作用结束后检测细胞培养上清液中乳酸脱氢酶(LDH)活性和谷草转氨酶(AST)活性,细胞的丙二醛(MDA)含量和谷胱甘肽(GSH)水平,以及细胞内超氧化物歧化酶(SOD)活性和过氧化氢酶(CAT)活性;另外,肝细胞在无水乙醇染毒前2 h 加入50μ mol/L 槲皮素预作用,预作用同时加入 HO-1抑制剂锌原卟啉Ⅸ(25μ mol/L),作用结束后同样检测上述指标。结果大鼠原代肝细胞经100 mmol/L 无水乙醇暴露8 h 后,LDH、AST 活性,MDA、GSH 含量和 SOD、CAT 活性与对照组相比,均有非常显着性差异(P<0.01);无水乙醇暴露前2 h 经50μ mol/L 槲皮素干预,肝细胞 LDH、AST 和 MDA 水平较无水乙醇组明显降低,GSH、SOD 和 CAT 水平较无水乙醇组明显升高。而在无水乙醇染毒同时用槲皮素干预,AST 的释放与 MDA 的生成与无水乙醇染毒组比较显着降低(P<0.01,P<0.05),细胞内 GSH 含量、SOD 活性与无水乙醇染毒组相比明显升高(P<0.05),LDH 释放和 CAT 水平变化不明显。无水乙醇染毒后的槲皮素干预无保护效应;槲皮素预干预同时用锌原卟啉Ⅸ抑制 HO-1活性,LDH、AST 和 MDA 水平较未加锌原卟啉Ⅸ的槲皮素预干预组有明显升高,而 GSH、SOD 和 CAT 水平则明显降低。结论槲皮素预干预可以通过减少 GSH 耗竭,提高抗氧化酶活性,抑制脂质过氧化来保护大鼠原代肝细胞抗酒精性氧化损伤,其保护效应可能通过 HO-1介导。更多还原