虎纹蛙两种GnRH的cDNA克隆和表达

【作者】 张利红； 邓一帆； 张为民； 高英；

【机构】 中山大学生命科学学院；

【摘要】 虎纹蛙(Ranarugulosa)是我国二级保护动物,也是唯一受保护的蛙类。我们通过反转录聚合酶链式反应(reversetranscriptionpolymerasechainreaction,RT-PCR)和快速扩增cDNA末端(rapidamplificationofcDNAends,RACE)的方法,从虎纹蛙下丘脑的总RNA中扩增出两种促性腺激素释放激素(gonadotropin-releasinghormone,GnRH)的全长cDNA,分别是mGnRH和cGnRH-II。虎纹蛙mGnRH存在两种转录形式,短的转录子长376bp,开放读码框编码90个氨基酸的多肽,包含24个氨基酸的信号肽、10个氨基酸的mGnRH、Gly-Lys-Arg加工位点和53个氨基酸的GnRH相关肽。长的转录子长519bp,它的5’端比短的转录形式多出143bp,cDNA的其他序列完全相同。虎纹蛙cGnRH-IIcDNA全长1545bp,开放读码框编码85个氨基酸的多肽,它包含24个氨基酸的信号肽、10个氨基酸的cGnRH-II、Gly-Lys-Arg加工位点和48个氨基酸的GnRH相关肽。Northern印迹显示mGnRH和cGnRH-II的转录子大小分别为0.5和1.6kb。cGnRH-II在前脑(包括嗅球和端脑)、中脑(包括下丘脑和顶盖-丘脑)和后脑(包括小脑和延髓)均有表达,在中脑的表达量最高;mGnRH在前脑有一定的表达。更多还原