用于糖尿病治疗的多基因修饰小型猪

【作者】 潘登科； 冯冲； 龙川； 于淑珍； 贺伸； 李西睿； 石宁宁；

【机构】 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所基因与细胞工程研究室； 四川农业大学动物科技学院；

【摘要】 <正>目的胰岛细胞移植是治疗糖尿病及其并发症的有效手段,猪胰岛细胞被认为是解决人类临床胰岛细胞供体短缺的最适宜来源。已有研究表明五指山小型猪的胰腺是分离纯化胰岛细胞的良好供体,但猪胰岛细胞异种移植面临着超急性免疫排斥和血液介导的炎症反应（IBMIR）等障碍。敲除猪α-1,3半乳糖基转移酶基因（GGTA1/）并导入人补体调节蛋白CD46基因可有效地阻断补体激活通路,抑制超急性免疫排斥的发生,在此基础上导入人CD39基因可以缓解炎症反应。本研究以敲除GGTA1基因的五指山小型猪（GalKO）为基础,导入人的CD46基因和CD39基因,培育用于胰岛细胞移植治疗糖尿病的多基因修饰猪。方法以GGTA1/五指山小型猪为供体猪建立GGTA1’猪耳成纤维细胞系,共转染人CD46基因启动子(hCD46^pr)表达的hCD46基因载体phCD46^pr-hCD46-Neo及猪胰岛细胞特异性启动子(INS^pr)表达的hCD39基因载体pINS^pr-hCD39-Hyg,更多还原