Characterization and expression pattern of p53 during spermatogenesis in the Chinese mitten crab Eriocheir sinens

【作者】 侯聪聪； 杨万喜；

【机构】 浙江大学生命科学学院精子实验室；

【摘要】 p53作为"基因组的守卫者"在各种组织中扮演不可或缺的作用,比如细胞循环的阻断、凋亡、DNA修复以及血管再生抑制。p53基因以及其蛋白在哺乳动物精子发生过程中执行许多必不可少的功能。为了探索p53在中华绒螯蟹(Eriocheirsinens)精子发生过程中的功能,我们通过兼并PCR和cDNA末端快速克隆技术从精巢中克隆了p53的cDNA片段。p53蛋白序列的比对显示其有保守的DNA结合区域,二聚体结合位点以及锌结合位点。进化树的分析揭示了p53与日本囊对虾和日本虎斑猛水蚤亲缘关系更接近。p53 mRNA在副性腺、肌肉、腮、心脏、肝胰腺以及精巢中都有明显的表达。原位杂交结果显示,在早期精细胞中,p53 mRNA在细胞核周围有微弱表达,但是在内陷的顶体管中有比较强烈的表达。在中期精细胞中,p53 mRNA信号要比早期强烈,其信号以点状分布于杯状细胞核的表面。顶体管上信号明显,而顶体帽上的信号比顶体管更强。在后期精细胞中,信号仍然主要集中在顶体帽和顶体管。杯状核周围分布着零星信号,但是信号很微弱。在成熟的精子中,信号明显地减少了。尽管其在杯状核和顶体管的信号还比较明显,但信号的强度远比中期微弱。根据以上的实验结果,我们推测p53在中华绒螯蟹精子发生过程中对顶体的发生和精核的成形起重要的作用(Mol Biol Rep40(2):1043-1051)。更多还原