阻断CD40/CD40L共刺激通路延长大鼠移植肝脏存活时间

【作者】 孙运鹏； 吴欢欢； 廖毅； 单云峰； 杨文军； 施红旗； 张启瑜；

【机构】 温州医学院附属第一医院肝胆外科；

【摘要】 目的利用腺病毒介导CD40Ig基因(AdCD40Ig)的方法阻断CD40/CD40L共刺激通路,探讨其对大鼠移植肝脏存活的影响和机制。方法将供受体大鼠随机分为4组(n=10),改良Kamada二袖套法建立Lewis到BN大鼠肝移植模型,A组:同基因移植组(BN→BN),B组:免疫排斥组,C组:AdLacZ对照组,供肝冷保存时经门静脉输注AdLacZ(1×109PFU/ml);D组:基因治疗组,供肝冷保存时经门静脉输注AdCD40Ig(1×109 PFU/ml)。术后分别用Lewis、F344大鼠脾细胞刺激受体大鼠脾细胞,进行单向混合淋巴细胞培养,观察各组大鼠存活时间、血清及肝内CD40Ig表达、细胞因子水平、刺激指数和移植肝病理情况。结果 D组大鼠存活时间(53.25±13.38)d,明显长于B组和C组(P<0.05);血清CD40Ig于术后7 d达高峰,以后逐渐下降但至70 d仍能检测到;A组和D组IL-2、IFN-γ水平较B、C组明显降低(P<0.05),D组IL-10较其他各组明显增加(P<0.05);单向混合淋巴细胞培养显示D组大鼠对于供体抗原特异性低应答;病理检查发现B、C两组术后4 d表现轻度排斥反应,术后7 d后出现中、重度排斥反应,汇管区淋巴细胞浸润明显,D组可见汇管区轻度炎症,组织损伤轻微,无明显血管损伤证据,病理评级与B、C组比较有统计学意义(P<0.05)。结论腺病毒介导CD40Ig基因可有效转染移植供肝,在受体内长期表达,减少汇管区淋巴细胞浸润,影响相关细胞因子的表达,对大鼠肝脏急性排斥反应有抑制作用,AdCD40Ig可通过阻断CD40/CD40L共刺激通路延长移植肝存活时间。更多还原