人血来源树突状细胞的培养及大黄素对其表型的影响

【作者】 林观样； 黄爱芳； 陈辉； 童洪飞； 林海舵； 张伟； 林胜璋；

【机构】 温州医学院附属第一医院； 温州医学院附属第二医院；

【摘要】 目的探讨人血来源树突状细胞(dendritic cell,DC)的培养方法及大黄素(emodin,EMO)对其表型的影响。方法分离健康人外周血单个核细胞,在重组人粒-巨噬细胞集落刺激因子(recombinant human granulocyte-macrophage colony stimulating factor,rh GM-CSF)和重组人白细胞介素-4(recombinant human interleukin-4,rh IL-4)的诱导下培养DC。培养的第5天和第7天分别加入脂多糖(1iopolysa charide,LPS)及EMO干扰,用倒置显微镜和电镜观察DC细胞形态,用流式细胞仪检测DC表面分子的分泌水平。结果用含rh GM-CSF 1000 IU/mL、rh IL-4 800 IU/mL的AIM-V培养基,及LPS刺激下,培养9天后可获得表面可见丰富的分叉状的胞浆突起的毛刺状细胞。经EMO处理后,DC表面突起短而少,CD80、CD83、CD86表面分子表达阳性率明显低于Mature DC(mDC)组,CD14高于mDC组(p<0.01)。结论用rh GM-CSF 1000 IU/mL+rh IL-4 800 IU/mL+AIM-V培养基+LPS刺激的可获的典型形态的mDC,而EMO则能干扰其表面突起的形成和表面分子的表达。更多还原