斑点杂交筛选As203诱导NB4细胞凋亡相关基因

【作者】 狄春红； 康云平； 谭晓华； 杨磊； 顾少华； 仙玲玲；

【机构】 杭州市第三人民医院检验科； 杭州师范大学医药卫生管理学院； 复旦大学生命科学学院遗传学研究所遗传工程国家重点实验室；

【摘要】 目的从三氧化二砷(As2O3)诱导的白血病细胞株NB4细胞凋亡相关基因文库中筛选凋亡相关基因。方法以α-32p为探针,斑点杂交技术从双向抑制性差减杂交构建的As2O3诱导NB4细胞凋亡相关基因文库筛选,经计算机处理后得到各个点的比值,选取有意义点测序后进行生物信息学分析。结果筛选出了在凋亡细胞中表达上调的基因11条和下调的基因6条。经生物信息学分析较有意义的上调基因主要包括:人核不均一蛋白K变异体;人转录延伸因子Ⅱ类似物;人邱吉尔结构域包含体1;人网格蛋白重链多肽;小鼠三磷酸腺苷酶1 26S亚单位;人三磷酸腺苷酶酶H+转运子V0亚单位变异体2;人拓扑异构酶Ⅱ;人TTK蛋白激酶;人心肌症相关蛋白3;酵母腺苷酸环化酶相关蛋白1;人RAS癌基因家族转录变异体1B。下调基因主要包括:肿瘤排斥抗原gp96 1变异体蛋白;多聚腺苷酸结合蛋白;c-myb基因;髓过氧化物酶;14-3-3 theta;类细胞因子1。结论经斑点杂交筛选出了NB4细胞凋亡差异表达基因,As2O3可能通过改变这些基因的表达诱导NB4细胞凋亡和抑制细胞周期。更多还原