成人慢性ITP患者外周血CD4+CD25+CD127-/low调节性T细胞、TCRvα24+vβ11+NKT细胞和Th1/Th2细胞因子的变化

【作者】 徐瑞龙； 郑昭璟； 马拥军； 胡少龙； 吴俊琪； 袁青； 胡英萍； 魏斌；

【机构】 金华市中心医院检验科； 金华市中心医院血液科；

【摘要】 目的结合血清细胞因子谱分析和网织血小板计数,分析成人慢性ITP患者外周血NKT细胞和Tregs细胞的变化及关系。方法利用多色流式细胞术方法检测外周血NKT细胞和Tregs细胞;利用双色流式细胞术防范检测外周血网织血小板数量;利用CBA技术结合流式细胞术分析血清IL12p70、IL10、IL2、IL8、IL6、IL5、IL4、IL1b、IFNγ、TNFα和TNFβ水平。结果慢性ITP组外周血RP的比例为10.08%±3.33%,而健康对照组外周血RP的比例为1.82%±0.26%,慢性ITP组RP明显高于健康对照组(P<0.05)。Plt计数<20×109/L的慢性ITP患者组RP为17.53%±7.56%,显著高于健康对照组的1.82%±0.26%(P<0.01)和Plt计数>20×109/L的慢性ITP患者组的4.95%±1.37%(P<0.05),而后两组间RP的差异无统计学意义(P>0.05)。慢性ITP组PBMNCs中NKT细胞的比例为0.13%±0.03%,对照组NKT细胞比例为0.07%±0.01%,两者间差异无统计学意义(P>0.05)。将慢性ITP组患者依据Plt计数情况进行细分后,我们发现Plt计数<20×109/L的慢性ITP患者组NKT为0.22%±0.05%,显著高于健康对照组的0.07%±0.01%(P<0.05)和Plt计数>20×109/L的慢性ITP患者组的0.05%±0.01%(P<0.05),而后两组间NKT的差异无统计学意义(P>0.05)。11种血清细胞因子水平在慢性ITP和对照组间的差异均无统计学意义(P>0.05)。慢性ITP组和对照组Th1/Th2型细胞因子比值分别为3.77±1.34和6.67±3.45,差异无统计学意义(P>0.05);1型/2型细胞因子比值分别为3.14±1.07和4.23±1.48,差异无统计学意义(P>0.05)。Plt计数>20×109/L的慢性ITP组血清IFN的慢性ITP组、Plt计数>20×109/L的慢性ITP组及对照组Th1/Th2型细胞因子比值分别为3.14±1.20、4.26±2.21及6.67±3.45,三者间差异无统计学意义(P>0.05);三组间1型/2型细胞因子比值分别为3.01±1.05、3.25±1.76及4.23±1.48,三者间差异也无统计学意义。慢性ITP患者外周血Plt计数与NKT细胞水平间存在负相关,相关系数(r)=-0.373,P=0.033。ITP组患者外周血Tregs和NKT细胞间无相关关系,但是Tregs细胞与Th1/Th2细胞因子比值间存在较强的正相关关系(r=0.451,P=0.011)。同时,血小板数与血清IL12p70、IFN、IL4及TNF水平也有正相关关系,相关系数分别为:r=0.354,P=0.044;r=0.365,P=0.037;r=0.354,P=0.044;r=0.366,P=0.036。结论我们推测NKT细胞在血小板重度减少的慢性ITP患者中发挥作用,而Tregs细胞和NKT细胞在慢性ITP患者中的变化似乎没有数量上的相关关系;NKT细胞和Tregs细胞可能与慢性ITP患者中细胞因子分泌的异常有关。更多还原